Fiche méthode

Coloration au jus de myrtille

Cette technique servira à observer des chromosomes dans des cellules en division, par exemple dans des racines.

Préparation de la plaque de titration

HCl : acide chlorhydrique

Provoque des brûlures. Irritant pour les voies respiratoires.

  1. Identifier le contenu des puits d'une plaque de titration (en les éloignant les uns des autres pour éviter les contaminations)  :
    • un puits "HCl" pour dissocier les cellules en lysant la paroi cellulosique
    • trois puits "H2O" pour le rinçage
    • un puits "colorant"

Coloration

  1. Récolter des échantillons (par exemple des extrémités de racines végétales)
Localisation des cellules en mitose dans une racine

Une racine pousse par la multiplication des cellules d'un méristème, situé à son extrémité (l'apex), sous la coiffe (un capuchon de cellules protectrices).

Source : https://forum.mikroscopia.com/topic/15731-m%C3%A9rist%C3%A8me-mitose/

  1. mettre les échantillons dans le puits "HCl" pendant 4 minutes
  2. transférer les échantillons successivement dans les trois puits de rinçage (1 minute dans chaque puits)
  3. transférer les échantillons dans le puits de coloration pendant 2 minutes

Squash

Le squash permet l'étalement des cellules, si nécessaire.

  1. déposer les échantillons dans une goutte d'eau sur une lame
  2. couvrir d'une lamelle
  3. couvrir de plusieurs épaisseurs de papier absorbant
  4. presser doucement la lamelle sur la lame (sans la déplacer latéralement sur celle-ci) de manière à obtenir un échantillon assez fin. C'est le "squash".
Exemple d'image obtenue

Observation au microscope optique après squash

Source : https://planet-vie.ens.fr/content/coloration-chromosomes-jus-myrtille