4-Variation génétique bactérienne et antibiotiques

Fiche technique - Réalisation d'un antibiogramme

Protocole

Pour des raisons de sécurité, la manipulation sera réalisée avec des produits de substitution et non des antibiotiques.

Matériel

  • 1 pince fine
  • 1 marqueur
  • papier essuie-tout
  • 1 étaleur « râteau »
  • 1 pince fine
  • 4 pastilles de papier filtre
  • lunettes de sécurité et gants
  • 1 tube de suspension bactérienne S (biopsie faite sur une personne malade)
  • 1 tube d'antibiotique A
  • 1 tube d'antibiotique E
  • 1 tube d'antibiotique C
  • 1 tube d'antibiotique P

Étapes de la manipulation

Étapes Notes Gabarit
1

Étaler la suspension de bactéries.
  • Verser 0,5 mL du contenu du tube S sur la gélose puis étaler avec le rateau sans enfoncer.
2

Préparer une pastille d'antibiotique.
  • En se servant d'une pince stérilisée, imbiber une pastille de papier filtre avec le premier antibiotique.
  • Rincer la pince dans le récipient prévu à cet effet.
3

Déposer la pastille sur la gélose.
  • Déposer la pastille sans abîmer la gélose, en suivant le gabarit ci-contre.
  • Répéter les étapes 2 et 3 avec les autres antibiotiques.
  • Rincer la pince à chaque fois.
4

Identifier les antibiotiques.
  • Sur le couvercle de la boîte de Pétri, repérer la position de chaque antibiotique en écrivant la lettre correspondante au-dessus de chaque pastille.
  • Faire un repère sur le couvercle et le fond de la boîte.

Lecture et interprétation des résultats

  1. Représenter le résultat obtenu (au bout de quelques minutes) sous la forme d'un croquis (les plages de lyse, qui correspondent aux zones de destruction des bactéries, apparaissent ici sous forme d'une décoloration de la gélose).
  2. Mesurer le diamètre des plages de lyse obtenues.
  3. Représenter graphiquement les résultats.
  4. Conclure.